摘要: 目的 探讨降钙素基因相关肽 (CGRP) 对 MC3T3-E1 细胞成骨分化的影响,并从 Wnt/β-catenin 信号通路角度初步探讨其可能的机 制。方法 实验分为 4 组,分别为空白对照组、CGRP 组、CGRP+CGRP 拮抗剂(CGRP8-37 组)、CGRP+DKK1 组。培养 4、7、14 d 应用荧光 定量核酸扩增(Q-PCR)检测法检测各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素 (OC)、Ⅰ型胶原 (COL Ⅰ )、RUN X2 基因、及 Wnt/β-catenin 信号通路 相关基因 (β-catenin、C-myc、TCF/LEF)的表达;4、7、14 d 采用 Western blot 法检测各组 β-catenin 蛋白表达情况;培养 7d 应用免疫荧光法检 测各组 β-catenin 的核转移情况。结果 (1)CGRP 能明显提高 MC3T3-E1 细胞 ALP、 OC、 COL Ⅰ、RUN X2 基因的表达; (2)CGRP 作用 于 MC3T3-E1 细胞能明显提高 C-myc、TCF/LEF 基因及 β-catenin 蛋白的表达,同时能提高细胞核内 β-catenin 蛋白蛋白的聚集。结论 CGRP 能 促进 MC3T3-E1 细胞成骨分化,Wnt/β-catenin 信号通路可能参与其调控。
摘要:目的 探讨降钙素基因相关肽 (CGRP) 对 MC3T3-E1 细胞成骨分化的影响,并从 Wnt/β-catenin 信号通路角度初步探讨其可能的机 制。方法 实验分为 4 组,分别为空白对照组、CGRP 组、CGRP+CGRP 拮抗剂(CGRP8-37 组)、CGRP+DKK1 组。培养 4、7、14 d 应用荧光 定量核酸扩增(Q-PCR)检测法检测各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素 (OC)、Ⅰ型胶原 (COL Ⅰ )、RUN X2 基因、及 Wnt/β-catenin 信号通路 相关基因 (β-catenin、C-myc、TCF/LEF)的表达;4、7、14 d 采用 Western blot 法检测各组 β-catenin 蛋白表达情况;培养 7d 应用免疫荧光法检 测各组 β-catenin 的核转移情况。结果 (1)CGRP 能明显提高 MC3T3-E1 细胞 ALP、 OC、 COL Ⅰ、RUN X2 基因的表达; (2)CGRP 作用 于 MC3T3-E1 细胞能明显提高 C-myc、TCF/LEF 基因及 β-catenin 蛋白的表达,同时能提高细胞核内 β-catenin 蛋白蛋白的聚集。结论 CGRP 能 促进 MC3T3-E1 细胞成骨分化,Wnt/β-catenin 信号通路可能参与其调控。
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