摘要: 目的　通过建立体外培养原代海马神经元的方法，用于研究尼古丁对海马神经形态及功能的影响。方法　取出生 24 小时以内的 C57BL/6 新生鼠，在培养液中剥离海马，将得到的海马体，轻柔切碎，置于含血清神经元培养液中反复吹打，进而沉淀，得到海马神经元悬液。 在培养过程中逐步剥夺血清，以筛除培养基中的神经胶质细胞，得到较纯的原代海马神经元细胞。尼古丁组细胞中加入 10umol 尼古丁，对照 组不做任何处理。DCX 免疫荧光染色用于确定对照组与尼古丁组中神经元的形态变化。凝胶电泳定量分析 DCX 在对照组和尼古丁组中蛋白水平 表达的变化。结果　通过此方法在神经元培养第 10 天，神经突触分支增多，形成神经网络。定量分析显示，与对照组相比，尼古丁组 DCX 蛋 白表达显著降低。结论　尼古丁可减少体外培养的原代海马神经元细胞神经突触分支的数量，并阻碍神经元神经网络的形成。