摘要: 为分析绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜表面脂蛋白p60的免疫学特性,本研究分别扩增p60蛋白N端与C端的基因,并通过重叠延伸PCR将C端基因序列中的TGA(1 459-1 461 bp)定点突变为同义密码子TGG.将扩增的基因片段分别插入到pET-32a(+)表达载体上,重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,得到分子质量约57 ku的p60-N蛋白和分子质量约为30.5 ku的p60-C蛋白;再对纯化后的重组蛋白进行Western blotting分析,结果表明重组蛋白均可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应,表明表达的重组蛋白p60-N和p60-C均有良好的反应原性.本研究为筛选MO主要的免疫原性蛋白和建立特异的血清学诊断方法提供了依据.
摘要：为分析绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜表面脂蛋白p60的免疫学特性,本研究分别扩增p60蛋白N端与C端的基因,并通过重叠延伸PCR将C端基因序列中的TGA(1 459-1 461 bp)定点突变为同义密码子TGG.将扩增的基因片段分别插入到pET-32a(+)表达载体上,重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,得到分子质量约57 ku的p60-N蛋白和分子质量约为30.5 ku的p60-C蛋白;再对纯化后的重组蛋白进行Western blotting分析,结果表明重组蛋白均可与MO阳性血清发生特异性免疫学反应,表明表达的重组蛋白p60-N和p60-C均有良好的反应原性.本研究为筛选MO主要的免疫原性蛋白和建立特异的血清学诊断方法提供了依据.
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| [1] | 王元元 严国 罗成 周永顺 . 绵羊DRB1基因外显子2酵母表面展示库的构建及鉴定 [J]. 中国畜牧兽医 ,2018,4 |
| [2] | 刘晓军 张立春 韩林凯 楚熹橦 崔成都 鲁承 金海国 孙福亮 . 绵羊角蛋白关联蛋白2基因的克隆表达与生物信息学分析 [J]. 中国畜牧兽医 ,2018,6 |
| [3] | 王佳丽 胡宏伟 王毅 田斌 张成虎 . 杜泊绵羊与湖羊和小尾寒羊杂交试验 [J]. 中国草食动物科学 ,2017,4 |
| [4] | 袁亚莉 . 青藏高原霍尔巴绵羊线粒体基因组研究 [J]. 中国草食动物科学 ,2017,6 |
| [5] | 王富强 杨孝朴 . 青藏高原阿旺绵羊线粒体基因组研究 [J]. 中国草食动物科学 ,2016,1 |
| [6] | 卢杰丽 李振 赵益文 孙笑尉 庞全海 . 周岁绵羊 Gnαs 基因的生物信息学分析 [J]. 中国草食动物科学 ,2016,3 |
| [7] | 邓桂馨 梁果义 鲁琳 刘京威 郭勇 倪和民 . 绵羊干扰素tau在毕赤酵母中的表达 [J]. 中国草食动物科学 ,2016,4 |
