荧光定量PCR技术用于UGT1A1基因多态性的检测

       摘要: 目的 UGT1A*28 和 *6 基因多态性与伊立替康治疗癌症患者引发毒性反应及严重程度之间关系密切,采取快速有效的检测方法为临床个体化用药提供依据意义重大。本文是应用荧光定量 PCR 技术,建立 UGT1A1*28 和 *6 基因位点的 PCR 快速分型方法。方法 应用 PrimerExpress3.0 软件,分别设计 2 对 qPCR 探针和 2 对扩增引物,在探针的 5’端分别标记 FAM 和 VIC 报告荧光,应用 7500 荧光定量 PCR 和普通 PCR 直接 sanger 测序两种方法,分别检测 30 份血样和 10 份血滤纸片样本的 UGT1A1*28 和 *6 两个位点基因的多态性,比较两种方法结果的一致性。结果 30 份血样和 10 份血滤纸片样本均得到了可靠的分型结果。讨论 建立的荧光定量 PCR 的分型方法操作简单、结果准确,适用于 UGT1A1*28 和 *6 基因多态性的快速分型检验。

作者:
孙利华  叶建伟
单位:
北京京煤集团总医院 北京 102300 北京诺赛基因检测有限公司 北京 102600
出处:
《医师在线》
刊期:
2018年第5卷第6期

荧光定量PCR技术用于UGT1A1基因多态性的检测

摘要: 目的 UGT1A*28 和 *6 基因多态性与伊立替康治疗癌症患者引发毒性反应及严重程度之间关系密切,采取快速有效的检测方法为临床个体化用药提供依据意义重大。本文是应用荧光定量 PCR 技术,建立 UGT1A1*28 和 *6 基因位点的 PCR 快速分型方法。方法 应用 PrimerExpress3.0 软件,分别设计 2 对 qPCR 探针和 2 对扩增引物,在探针的 5’端分别标记 FAM 和 VIC 报告荧光,应用 7500 荧光定量 PCR 和普通 PCR 直接 sanger 测序两种方法,分别检测 30 份血样和 10 份血滤纸片样本的 UGT1A1*28 和 *6 两个位点基因的多态性,比较两种方法结果的一致性。结果 30 份血样和 10 份血滤纸片样本均得到了可靠的分型结果。讨论 建立的荧光定量 PCR 的分型方法操作简单、结果准确,适用于 UGT1A1*28 和 *6 基因多态性的快速分型检验。

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