摘要: 采用 Sephacryl S-300过滤层析和 DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析相结合的方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)成熟卵子匀浆液中分离纯化出了一种高分子量的蛋白。该蛋白能被 Schiff 试剂、甲基绿和苏丹黑 B 着色, Western blot 显示能被金鱼卵黄脂磷蛋白(lipovitellin, Lv)多克隆抗血清特异性识别,在非变性条件下分子量约为560 kD,在 SDS 变性条件下分子量约为112 kD,结果表明分离纯化的蛋白是一种含有糖、磷、脂基团的蛋白,符合鱼类 Lv 的性质,且与金鱼 Lv 有免疫交叉反应,从蛋白的性质和免疫原性以及分子量大小等角度判断,本研究获得的高纯度蛋白为尼罗罗非鱼卵黄脂磷蛋白；纯化的罗非鱼 Lv 在反复冻融、37℃及60℃处理条件下均未出现降解,表明罗非鱼 Lv 比鱼类卵黄原蛋白(Vitellogenin, Vtg)更为稳定。研究结果为罗非鱼 Lv 抗体的制备奠定了基础。