摘要: 背景与目的 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EFGR)突变与肺腺癌侵袭转移密切相关,CXCR4/CXCL12(chemokine receptor 4/chemokine ligand 12)生物学轴在肿瘤器官特异性转移中发挥重要作用,二者在肺腺癌转移过程中是否存在相互作用尚未明确.本研究旨在探索EGFR过表达和不同位点突变对肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响,并探讨其潜在机制.方法 构建EGFR过表达、EGFR-E746-A750缺失型(DEL,19号外显子突变)、EGFR-T790M突变型(790M,20号外显子突变)、EGFR-L858R的突变型(LR,21号外显子突变)及EGFR空载质粒,应用Lipofectamine 2000转染H1299肺腺癌细胞.应用细胞克隆实验、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测EGFR过表达和突变对H1299细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并应用RT-PCR和Western blot检测CXCR4、CXCL12,以及该信号通路下游基因MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平.结果 EGFR过表达和EGFR-E746-A750缺失组细胞克隆形成数目分别为28+2、28.33+4.16,且细胞迁移和侵袭能力显著高于阴性对照组与空白对照组(P＜0.05).RT-PCR和Western blot实验显示EGFR过表达和EGFR-E746-A750缺失组CXCR4、CXCL12、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05).结论 EGFR基因过表达和19号外显子缺失突变可通过上调CXCR4/CXCL 12信号通路,促进MMP-2、MMP-9表达,从而引起肺腺癌细胞的肿瘤生物学特性发生改变,并具有更强的增殖、迁移和侵袭能力.
摘要：背景与目的 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EFGR)突变与肺腺癌侵袭转移密切相关,CXCR4/CXCL12(chemokine receptor 4/chemokine ligand 12)生物学轴在肿瘤器官特异性转移中发挥重要作用,二者在肺腺癌转移过程中是否存在相互作用尚未明确.本研究旨在探索EGFR过表达和不同位点突变对肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响,并探讨其潜在机制.方法 构建EGFR过表达、EGFR-E746-A750缺失型(DEL,19号外显子突变)、EGFR-T790M突变型(790M,20号外显子突变)、EGFR-L858R的突变型(LR,21号外显子突变)及EGFR空载质粒,应用Lipofectamine 2000转染H1299肺腺癌细胞.应用细胞克隆实验、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测EGFR过表达和突变对H1299细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并应用RT-PCR和Western blot检测CXCR4、CXCL12,以及该信号通路下游基因MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平.结果 EGFR过表达和EGFR-E746-A750缺失组细胞克隆形成数目分别为28+2、28.33+4.16,且细胞迁移和侵袭能力显著高于阴性对照组与空白对照组(P＜0.05).RT-PCR和Western blot实验显示EGFR过表达和EGFR-E746-A750缺失组CXCR4、CXCL12、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05).结论 EGFR基因过表达和19号外显子缺失突变可通过上调CXCR4/CXCL 12信号通路,促进MMP-2、MMP-9表达,从而引起肺腺癌细胞的肿瘤生物学特性发生改变,并具有更强的增殖、迁移和侵袭能力.
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