冠心合剂主要活性成分对TNF-a损伤血管内皮细胞保护作用的实验研究

       摘要: 目的:研究冠心合剂主要活性成分对由TNF-a损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法:将人脐静脉内皮细胞进行常规细胞培养、传代,后分为对照组、TNF-α组、药物活性成分组;其中对照组不加任何药物,于培养箱培养24 h后待检;TNF-α组细胞先正常培养18 h,后加入200 ng/m L的TNF-α作用6 h后,PBS洗涤待测;药物活性成分组分别加入80μg/m L、30μg/m L、20μg/m L、20μg/m L浓度的黄芪甲苷、槲皮素、异鼠李素、β-谷甾醇(药物浓度已经前期实验MTS法验证),培养18 h,再加入浓度为200 ng/m L的TNF-α继续培养6 h后,PBS洗涤细胞待测。通过TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法)进行定量检测、DNA Ladder(琼脂糖凝胶电泳)进行定性检测。结果:TUNEL实验中,光镜下可看到冠心合剂主要活性成分组细胞的结构完整性优于TNF-α组,且凋亡细胞数明显少于TNF-α组(P﹤0.001)。四种药物相关活性成分中以黄芪甲苷对内皮细胞保护作用明显(P﹤0.001)。结论:冠心合剂相关药物活性成分能明显保护由TNF-α损伤的内皮细胞。四种药物相关活性成分中以黄芪甲苷对内皮细胞的保护作用最明显(P﹤0.001)。本实验琼脂糖凝胶电泳结果中并未出现细胞凋亡条带,考虑与细胞凋亡程度及凋亡时间的非同步性有关。

作者:
祝光礼 刘昭 杨利利
单位:
浙江中医药大学附属广兴医院心内科 浙江杭州310007
出处:
《中华中医药学刊》
刊期:
2016年第34卷第2期
基金:
浙江省自然科学基金项目(Y2080946)

冠心合剂主要活性成分对TNF-a损伤血管内皮细胞保护作用的实验研究

摘要:目的:研究冠心合剂主要活性成分对由TNF-a损伤的血管内皮细胞的保护作用。方法:将人脐静脉内皮细胞进行常规细胞培养、传代,后分为对照组、TNF-α组、药物活性成分组;其中对照组不加任何药物,于培养箱培养24 h后待检;TNF-α组细胞先正常培养18 h,后加入200 ng/m L的TNF-α作用6 h后,PBS洗涤待测;药物活性成分组分别加入80μg/m L、30μg/m L、20μg/m L、20μg/m L浓度的黄芪甲苷、槲皮素、异鼠李素、β-谷甾醇(药物浓度已经前期实验MTS法验证),培养18 h,再加入浓度为200 ng/m L的TNF-α继续培养6 h后,PBS洗涤细胞待测。通过TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法)进行定量检测、DNA Ladder(琼脂糖凝胶电泳)进行定性检测。结果:TUNEL实验中,光镜下可看到冠心合剂主要活性成分组细胞的结构完整性优于TNF-α组,且凋亡细胞数明显少于TNF-α组(P﹤0.001)。四种药物相关活性成分中以黄芪甲苷对内皮细胞保护作用明显(P﹤0.001)。结论:冠心合剂相关药物活性成分能明显保护由TNF-α损伤的内皮细胞。四种药物相关活性成分中以黄芪甲苷对内皮细胞的保护作用最明显(P﹤0.001)。本实验琼脂糖凝胶电泳结果中并未出现细胞凋亡条带,考虑与细胞凋亡程度及凋亡时间的非同步性有关。

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