海湾扇贝精液超低温冷冻保存技术的初步研究

       摘要: 分别采用自然排放和解剖的方式获取海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)精液,采用传统的分步降温法,从抗冻保护剂、精液稀释比例、降温程序、解冻温度和精子质量评价等方面探究海湾扇贝精液超低温冷冻保存技术.研究发现,海湾扇贝精子超低温冷冻保存效果最好的方案为:以解剖的方式获取海湾扇贝精液,用浓度20%的二甲基亚砜作为抗冻保护剂,以体积比2∶1与精液混合,控制总体积0.5~1 mL;体系经4℃平衡5 min后,于液氮面以上10 cm稳定5 min,投入液氮保存;解冻时,体系于30℃水浴中摇动融化.此方案下,精子解冻后活力最高,晃动和游动精子比例达到86.0%.将解冻后的海湾扇贝精子与虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)卵子人工授精,发现虾夷扇贝卵子可以受精并孵化,受精率为21.7%,这证实了此冻存方案的可行性.本研究完善了扇贝精液超低温保存的方法和流程,对于海湾扇贝种质资源保护、跨季杂交育种等研究有参考价值.

作者:
马培振 张哲 于瑞海 王昭萍 李鹏飞
单位:
海水养殖教育部重点实验室(中国海洋大学),山东青岛,266003 莱州市长渔水产有限公司,山东烟台,261415
出处:
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
刊期:
2018年第48卷第9期
基金:
海洋经济创新发展区域示范专项-海洋药源生物种质资源库建设项目(12PYY001SF08-ZGHYDH-1) 中国海洋大学水生生物种质资源标准化及资源共享项目资助

海湾扇贝精液超低温冷冻保存技术的初步研究

摘要:分别采用自然排放和解剖的方式获取海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)精液,采用传统的分步降温法,从抗冻保护剂、精液稀释比例、降温程序、解冻温度和精子质量评价等方面探究海湾扇贝精液超低温冷冻保存技术.研究发现,海湾扇贝精子超低温冷冻保存效果最好的方案为:以解剖的方式获取海湾扇贝精液,用浓度20%的二甲基亚砜作为抗冻保护剂,以体积比2∶1与精液混合,控制总体积0.5~1 mL;体系经4℃平衡5 min后,于液氮面以上10 cm稳定5 min,投入液氮保存;解冻时,体系于30℃水浴中摇动融化.此方案下,精子解冻后活力最高,晃动和游动精子比例达到86.0%.将解冻后的海湾扇贝精子与虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)卵子人工授精,发现虾夷扇贝卵子可以受精并孵化,受精率为21.7%,这证实了此冻存方案的可行性.本研究完善了扇贝精液超低温保存的方法和流程,对于海湾扇贝种质资源保护、跨季杂交育种等研究有参考价值.

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