摘要: 目的:明确18α-甘草次酸(18α-GA)对核因子E2相关因子2(Nrf2)的激活作用,观察上调Nrf2对成体神经干细胞(aNSCs)增殖和分化能力的影响,探讨维持aNSCs活力的有效途径.方法:体外培养新生、成年和老年小鼠的侧脑室室膜下区神经干细胞(NSCs),观察随年龄增长NSCs中Nrf2的表达变化.以18α-GA作用aN-SCs,用real-time PCR和Western blot实验比较18α-GA组与DMSO对照组aNSCs的Nrf2表达变化.构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的Nrf2-shRNA慢病毒载体(LV)感染aNSCs,用real-time PCR和Western blot实验检测shRNA对Nrf2的沉默效率.将aNSCs按照干预条件不同分为DMSO组、18α-GA组、LV-GFP组和LV-Nrf2-shRNA组,运用BrdU掺入实验、Tuj1免疫荧光染色、CCK-8实验、Hoechst 33342/PI双染色和活性氧簇(ROS)水平测定等方法评价18α-GA是否通过激活Nrf2对aNSCs的增殖、分化、细胞活力、细胞凋亡以及氧化应激水平产生影响.结果:随年龄增长,成年和老年小鼠aNSCs的Nrf2 mRNA表达水平较新生小鼠NSCs显著降低(P<0.01),但aNSCs的ROS水平显著高于新生小鼠NSCs(P<0.05).应用18α-GA后,aNSCs的Nrf2 mRNA与蛋白表达水平较DMSO组明显升高(P<0.01),并且aNSCs的BrdU阳性率也显著增加(P<0.01).2 mg/L 18α-GA作用后,aNSCs的Tuj1阳性率和细胞活力较DMSO组显著升高(P<0.05),而凋亡率和ROS水平显著下降(P<0.05和P<0.01).但是,敲减aNSCs的Nrf2并应用18α-GA干预后,LV-Nrf2-shRNA组BrdU阳性率、Tuj1阳性率以及细胞活力均较LV-GFP组显著下降(P<0.05),ROS水平却显著上升(P<0.05).结论:18α-GA可能通过激活Nrf2提高aNSCs的抗氧化能力,促进aNSCs增殖和分化,维持aNSCs潜能.