摘要: 目的 检测NLRC4在败血症儿童血液中的表达,并研究NLRC4在细胞因子产生中的重要性,以及脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞中NLRC4表达的信号传导通路,并研究LPS对巨噬细胞中NLRC4表达的影响.方法 1.采用逆转录-定量聚合酶链反应和Western blot分析法,测定败血症组(n=42)和对照组(n=40)儿童NLRC4的mRNA和蛋白质表达水平;2.在体外使用LPS刺激RAW264.7巨噬细胞,并测定NLRC4及细胞因子表达水平,以研究LPS对NLRC4表达的调节作用;3.在LPS诱导下使用NLRC4 siRNA转染RAW264.7细胞,并再次测定NLRC4及细胞因子表达水平,研究NLRC4对产生炎症细胞因子的影响;4.阻断MAPK信号传导通路,测定NLRC4的表达水平.结果 1.与对照组相比,败血症组NLRC4的mRNA及蛋白质表达水平显著增加;2.NLRC4表达水平随着细胞使用含LPS的培养基培养时间的延长及浓度的增高而显著增加;3.在LPS诱导下经NLRC4 siRNA转染后的RAW264.7细胞中,IL-1β和IL-18的产生明显增加;4.阻断MAPK信号传导通路后,NLRC4的表达水平显著降低.结论 NLRC4在败血症儿童血清中的表达增加;Western blot的结果表明在RAW264.7细胞中LPS以时间和剂量依赖性方式诱导NLRC4表达;ELISA结果显示,通过NLRC4 siRNA转染RAW264.7细胞增强了LPS对IL-1β和IL-18产生的作用;LPS诱导NLRC4的表达水平与MAPK信号传导通路有关.