鱼腥草注射液介导p38MAPK信号转导诱导人肝癌程序性死亡

       摘要: 目的 探究鱼腥草注射液诱导人肝癌细胞程序性死亡和程序性死亡相关基因表达的 P38MAPK 信号转导通路, 阐明肝癌治疗的分子机理。方法 将 5、10、20mg/L 鱼腥草注射液分别培养人肝癌 SMMC-7721 细胞 48 h 后,通过免疫组织 染色观察细胞程序性死亡的情况;通过琼脂糖凝胶电泳分析和观察程序性死亡细胞特征性 DNA 区带;流式细胞仪法 (Flow cytometry,FCM) 检测细胞程序性死亡和细胞周期;荧光定量 PCR 检测 Fas 和 Caspase-9 基因 mRNA 的表达水平,并比较阻 断 p38MAPK 信号通路后鱼腥草注射液对肝癌细胞凋亡和 Fas 和 Caspase-9 基因 mRNA 的表达。结果 鱼腥草注射液作用 48h 后,荧光显微镜下观察到经 Hoechst 染色的典型程序性死亡细胞,琼脂糖凝胶电泳可见程序性死亡细胞 DNA 呈规律性的梯 状条带。5、10、20mg/L 浓度鱼腥草注射液作用人肝癌细胞后的细胞程序性死亡率分别为 12.83%±1.51%,17.86%±2.70% 和 29.24%±7.58%,与对照组 6.30%±2.08% 比较均有显著性差异 (P<0.01),阻断 p38MAPK 信号通路后,程序性死亡率和 G0/G1 期 细胞比例明显降低 (P<0.01)。10 mg/L 鱼腥草注射液作用人肝癌细胞 48h 后 Fas mRNA 和 Caspase-9 mRNA 的表达明显上升,阻 断 p38MAPK 信号通路后,鱼腥草注射液作用人肝癌细胞的 FasmRNA 和 Caspase-3mRNA 的表达明显下降。结论 鱼腥草注射 液能诱导肝人癌细胞株 SMMC-7721 程序性死亡, 阻滞肝癌细胞于 G 0 /G1 期,通过 P38MAPK 信号转导通路上调 Fas、Caspase- 9mRNA 的表达可能是其诱导肝癌细胞程序性死亡的重要机制。

作者:
曾红波  黄波  李兵峰  高风华  刘庆华  陈凯  杨文伦
单位:
天门市第二人民医院外科  湖北天门  431700
出处:
《名医》
刊期:
2016年第7卷第7期

鱼腥草注射液介导p38MAPK信号转导诱导人肝癌程序性死亡

摘要:目的 探究鱼腥草注射液诱导人肝癌细胞程序性死亡和程序性死亡相关基因表达的 P38MAPK 信号转导通路, 阐明肝癌治疗的分子机理。方法 将 5、10、20mg/L 鱼腥草注射液分别培养人肝癌 SMMC-7721 细胞 48 h 后,通过免疫组织 染色观察细胞程序性死亡的情况;通过琼脂糖凝胶电泳分析和观察程序性死亡细胞特征性 DNA 区带;流式细胞仪法 (Flow cytometry,FCM) 检测细胞程序性死亡和细胞周期;荧光定量 PCR 检测 Fas 和 Caspase-9 基因 mRNA 的表达水平,并比较阻 断 p38MAPK 信号通路后鱼腥草注射液对肝癌细胞凋亡和 Fas 和 Caspase-9 基因 mRNA 的表达。结果 鱼腥草注射液作用 48h 后,荧光显微镜下观察到经 Hoechst 染色的典型程序性死亡细胞,琼脂糖凝胶电泳可见程序性死亡细胞 DNA 呈规律性的梯 状条带。5、10、20mg/L 浓度鱼腥草注射液作用人肝癌细胞后的细胞程序性死亡率分别为 12.83%±1.51%,17.86%±2.70% 和 29.24%±7.58%,与对照组 6.30%±2.08% 比较均有显著性差异 (P<0.01),阻断 p38MAPK 信号通路后,程序性死亡率和 G0/G1 期 细胞比例明显降低 (P<0.01)。10 mg/L 鱼腥草注射液作用人肝癌细胞 48h 后 Fas mRNA 和 Caspase-9 mRNA 的表达明显上升,阻 断 p38MAPK 信号通路后,鱼腥草注射液作用人肝癌细胞的 FasmRNA 和 Caspase-3mRNA 的表达明显下降。结论 鱼腥草注射 液能诱导肝人癌细胞株 SMMC-7721 程序性死亡, 阻滞肝癌细胞于 G 0 /G1 期,通过 P38MAPK 信号转导通路上调 Fas、Caspase- 9mRNA 的表达可能是其诱导肝癌细胞程序性死亡的重要机制。

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