摘要: 目的 研究不同能量参数的810 nm弱激光照射对于巨噬细胞极化状态的影响.方法 体外分离、培养BALB/c小鼠来源的骨髓巨噬细胞,应用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)条件性培养基培养的骨髓细胞,流式细胞术检测F4/80表达鉴定培养结果.脂多糖-γ干扰素(LPS-IFN-γ)刺激进行M1细胞极化诱导,反转录PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)、CD86 mRNA水平,Western blot法检测iNOS和Arg1蛋白水平.应用(1、2、3、4)J/cm2的810 nm弱激光对体外培养的M1细胞进行照射,MTT法检测细胞增殖,免疫荧光细胞化学染色检测iNOS、Arg1的表达,反转录PCR检测M1细胞iNOS、Arg1 mRNA水平,Western blot法检测M1细胞iNOS、Arg1蛋白水平.结果 流式细胞术结果证明分离细胞的F4/80阳性率达99.9％.骨髓源性巨噬细胞在LPS-IFN-γ刺激下,高表达iNOS和CD86 mRNA.Western blot法检测发现,给予极化刺激后,骨髓源性巨噬细胞高表达iNOS和CD86蛋白.不同能量的弱激光照射M1型巨噬细胞,MTT法检测发现,(1、2、3)J/cm2弱激光刺激时,M1细胞活力与对照组比较无显著性差异;4 J/cm2刺激时,M1细胞活力降低.免疫荧光细胞化学染色显示,与对照组比较,(1、2) J/cm2照射时,M2型巨噬细胞标志物Arg1阳性细胞数无明显差异,照射剂量为(3、4) J/cm2时,Arg1阻性细胞数显著增多,M1型巨噬细胞标志物iNOS阳性细胞数显著减少.与对照组比较,照射剂量为(1、2)J/cm2时,iNOS及Arg1 mRNA和蛋白表达水平无明显变化,在照射剂量为(3、4) J/cm2时,iNOS mRNA和蛋白水平表达下降,Arg1 mRNA和蛋白水平表达升高.结论 (1、2) J/cm2的810 nm弱激光对于M1型巨噬细胞活力及极化无影响.照射剂量为3 J/cm2时,M1型巨噬细胞可向M2型巨噬细胞极化,且细胞活性无明显变化.但照射能量为4 J/cm2时,M1型细胞虽然可向M2型细胞极化但同时伴有细胞活性降低.