高温胁迫下刺参肠道细胞应激颗粒标记蛋白TIA-1的表达特征

       摘要: 产生应激颗粒是生物体遭受不利环境时细胞产生的一种自我保护机制,基于此,本研究开展了高温胁迫下刺参(Apostichopus japonicus)肠道细胞中应激颗粒(Stress granule)标记蛋白基因TIA-1表达特征的研究.采用RACE技术克隆了刺参T细胞胞内抗原-1基因(TIA-1)全长cDNA序列.该基因cDNA全长为3108 bp,包括16 bp的5'UTR,1284 bp的开放阅读框(ORF),1808 bp的3'UTR,编码427个氨基酸.结构分析表明,刺参TIA-1基因编码3个N末端RNA识别基序(RRM)和2个类似蛋白聚集区的C末端区域(low complexity).系统进化树分析表明,刺参TIA-1与软体动物门鸭嘴海豆芽(Lingula anatina)TIAR聚为一支,具有最近的亲缘关系.使用Western blotting技术检测目的蛋白TIA-1在全细胞和亚细胞成分中的表达差异,并且利用细胞免疫荧光技术检测细胞在高温胁迫下TIA-1的定位情况.研究结果表明,刺参肠道细胞TIA-1在高温胁迫下在细胞质中表达量显著上升(P<0.05),且高温胁迫下TIA-1定位表达发生变化,多分布在细胞核周围,由此推断TIA-1在刺参高温应激时可能参与了应激颗粒的生成,从而对刺参肠道细胞起到了保护作用.

作者:
王莎莎 王天明 秦英惠 陈慕雁
单位:
中国海洋大学 水产学院,海水养殖教育部重点实验室,山东 青岛 266003 浙江海洋大学 海洋科学与技术学院,海洋生物种质资源发掘利用国家地方联合工程实验室,浙江 舟山 316000 中国海洋大学 水产学院,水产病害与免疫学研究室,山东 青岛 266003
出处:
《中国水产科学》
刊期:
2018年第25卷第3期
基金:
国家自然科学基金项目(31472257)

高温胁迫下刺参肠道细胞应激颗粒标记蛋白TIA-1的表达特征

摘要: 产生应激颗粒是生物体遭受不利环境时细胞产生的一种自我保护机制,基于此,本研究开展了高温胁迫下刺参(Apostichopus japonicus)肠道细胞中应激颗粒(Stress granule)标记蛋白基因TIA-1表达特征的研究.采用RACE技术克隆了刺参T细胞胞内抗原-1基因(TIA-1)全长cDNA序列.该基因cDNA全长为3108 bp,包括16 bp的5'UTR,1284 bp的开放阅读框(ORF),1808 bp的3'UTR,编码427个氨基酸.结构分析表明,刺参TIA-1基因编码3个N末端RNA识别基序(RRM)和2个类似蛋白聚集区的C末端区域(low complexity).系统进化树分析表明,刺参TIA-1与软体动物门鸭嘴海豆芽(Lingula anatina)TIAR聚为一支,具有最近的亲缘关系.使用Western blotting技术检测目的蛋白TIA-1在全细胞和亚细胞成分中的表达差异,并且利用细胞免疫荧光技术检测细胞在高温胁迫下TIA-1的定位情况.研究结果表明,刺参肠道细胞TIA-1在高温胁迫下在细胞质中表达量显著上升(P<0.05),且高温胁迫下TIA-1定位表达发生变化,多分布在细胞核周围,由此推断TIA-1在刺参高温应激时可能参与了应激颗粒的生成,从而对刺参肠道细胞起到了保护作用.

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