敲低AKT1基因增强裸鼠胃癌移植瘤对阿霉素的敏感性

       摘要: 目的 研究敲低AKT1基因对裸鼠胃癌移植瘤阿霉素敏感性的影响.方法 构建AKT1基因RNA干扰(RNAi)的慢病毒载体pGCSIL-shAKT1-GFP,转染HEK293T细胞,以pGCSIL-shCON-GFP为空载体组.获得慢病毒颗粒后,感染胃癌BGC-823细胞,采用Western blot法检测感染后BGC-823细胞中AKT1蛋白水平.皮下注射慢病毒感染的BGC-823细胞构建裸鼠胃癌移植瘤模型,使用阿霉素(DOX)进行处理,观察处理后移植瘤体积大小并绘制肿瘤生长曲线,采用HE染色观察移植瘤组织病变情况,采用组织原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 成功构建AKT1基因RNAi的慢病毒载体并成功感染胃癌BGC-823细胞,感染后胃癌BGC-823细胞中AKT1蛋白水平明显降低.敲低AKT1的BGC-823细胞裸鼠移植后,移植瘤生长减慢、移植瘤细胞凋亡增加,并可增强DOX对移植瘤生长的抑制作用.结论 敲低AKT1基因可增强BGC-823细胞裸鼠移植瘤对DOX的敏感性.

作者:
周巍 付雪琼 于红刚
单位:
武汉大学人民医院消化内科,湖北武汉,430060
出处:
《细胞与分子免疫学杂志》
刊期:
2017年第33卷第10期
基金:
国家自然科学基金

敲低AKT1基因增强裸鼠胃癌移植瘤对阿霉素的敏感性

摘要:目的 研究敲低AKT1基因对裸鼠胃癌移植瘤阿霉素敏感性的影响.方法 构建AKT1基因RNA干扰(RNAi)的慢病毒载体pGCSIL-shAKT1-GFP,转染HEK293T细胞,以pGCSIL-shCON-GFP为空载体组.获得慢病毒颗粒后,感染胃癌BGC-823细胞,采用Western blot法检测感染后BGC-823细胞中AKT1蛋白水平.皮下注射慢病毒感染的BGC-823细胞构建裸鼠胃癌移植瘤模型,使用阿霉素(DOX)进行处理,观察处理后移植瘤体积大小并绘制肿瘤生长曲线,采用HE染色观察移植瘤组织病变情况,采用组织原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 成功构建AKT1基因RNAi的慢病毒载体并成功感染胃癌BGC-823细胞,感染后胃癌BGC-823细胞中AKT1蛋白水平明显降低.敲低AKT1的BGC-823细胞裸鼠移植后,移植瘤生长减慢、移植瘤细胞凋亡增加,并可增强DOX对移植瘤生长的抑制作用.结论 敲低AKT1基因可增强BGC-823细胞裸鼠移植瘤对DOX的敏感性.

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