重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)的原核表达及纯化

       摘要: 目的 合成重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)蛋白.方法 利用基因工程技术,克隆并重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A盒基因;利用原核表达技术,表达并纯化重组大鼠HMGB1-A盒蛋白,并利用Western blot法进行验证.结果 琼脂糖凝胶电泳分析显示HMGB1-A盒基因大小约为250 bp;重组克隆pUC-A经双酶切鉴定,产物大小约为3000bp、250 bp;重组克隆pGEX-A PCR产物大小约为250 bp.原核表达产物Mr大小约为36 000,与预期一致.结论 成功表达并纯化HMGB1-A盒蛋白.

作者:
何林全 刘家云 屈园利 刘西涛 李晓东 龙铟
单位:
空军军医大学附属一院中医科,陕西西安710032;武警新疆总队克拉玛依市支队卫生队,新疆克拉玛依834000 空军军医大学附属一院检验科,陕西西安,710032 空军军医大学附属一院中医科,陕西西安,710032
出处:
《细胞与分子免疫学杂志》
刊期:
2017年第33卷第9期
基金:
陕西省社会发展攻关计划项目

重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)的原核表达及纯化

摘要: 目的 合成重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A结构域(HMGB1-A)蛋白.方法 利用基因工程技术,克隆并重组大鼠高迁移率族蛋白B1 A盒基因;利用原核表达技术,表达并纯化重组大鼠HMGB1-A盒蛋白,并利用Western blot法进行验证.结果 琼脂糖凝胶电泳分析显示HMGB1-A盒基因大小约为250 bp;重组克隆pUC-A经双酶切鉴定,产物大小约为3000bp、250 bp;重组克隆pGEX-A PCR产物大小约为250 bp.原核表达产物Mr大小约为36 000,与预期一致.结论 成功表达并纯化HMGB1-A盒蛋白.

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