多聚甲醛处理的昆明小鼠T细胞及其亚群存放不同时间分析

       摘要: 目的 确定昆明小鼠CD3e+ CD4+T细胞和CD3e+ CD8a+T细胞两种淋巴细胞的可存放时间.方法 无菌收集昆明小鼠抗凝血和脾脏并制备单细胞悬液,经荧光基团标记的抗体对CD3e、CD4、CD8a进行标记、多聚甲醛处理后运用三色标记流式细胞术分点检测4℃避光保存的待检样品的可存放情况,采用最小二乘法拟合最佳回归曲线,计算各时间点上淋巴细胞含量并进行统计学分析,同设多聚甲醛未处理组.结果 昆明小鼠脾组织内CD3e+ CD4+T细胞和CD3e+ CD8a+T淋巴细胞经多聚甲醛处理后分别在第11天和第16天显著降低,未经多聚甲醛处理样品的这两个亚群细胞则在第8天和第11天显著降低;经多聚甲醛处理的外周血T淋巴细胞的可存放时间较长(均为第18天),高于未处理组(第10天和第15天).结论 流式细胞术检测多聚甲醛处理的昆明小鼠脾组织和外周血T淋巴细胞应在第11天前完成.

作者:
郭海婷 胡超 严普 李中原 陈志宝
单位:
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆,163319 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州730046
出处:
《细胞与分子免疫学杂志》
刊期:
2017年第33卷第4期
基金:
国家自然科学基金 甘肃省创新研究群体计划项目

多聚甲醛处理的昆明小鼠T细胞及其亚群存放不同时间分析

摘要:目的 确定昆明小鼠CD3e+ CD4+T细胞和CD3e+ CD8a+T细胞两种淋巴细胞的可存放时间.方法 无菌收集昆明小鼠抗凝血和脾脏并制备单细胞悬液,经荧光基团标记的抗体对CD3e、CD4、CD8a进行标记、多聚甲醛处理后运用三色标记流式细胞术分点检测4℃避光保存的待检样品的可存放情况,采用最小二乘法拟合最佳回归曲线,计算各时间点上淋巴细胞含量并进行统计学分析,同设多聚甲醛未处理组.结果 昆明小鼠脾组织内CD3e+ CD4+T细胞和CD3e+ CD8a+T淋巴细胞经多聚甲醛处理后分别在第11天和第16天显著降低,未经多聚甲醛处理样品的这两个亚群细胞则在第8天和第11天显著降低;经多聚甲醛处理的外周血T淋巴细胞的可存放时间较长(均为第18天),高于未处理组(第10天和第15天).结论 流式细胞术检测多聚甲醛处理的昆明小鼠脾组织和外周血T淋巴细胞应在第11天前完成.

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