摘要: 为制备新型鸭呼肠孤病毒(new-type duck reovirus,NDRV)XX 株σB 蛋白的多克隆抗体,试验经 RT-PCR扩增 NDRV XX 株σB 基因编码序列,构建原核表达质粒 pET-32a(+)-σB,将其转化至大肠杆菌 BL21(DE3)感受态细胞后,经 IPTG 诱导获得 His-σB 重组蛋白。SDS-PAGE 显示成功表达出约55 ku 的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,其表达时的最佳诱导时间、IPTG 诱导浓度分别为3 h 和0.25 mmol/L。经 Ni2+柱亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,将蛋白经 Western blotting 和蛋白质谱鉴定为高纯度的σB 重组蛋白,将纯化后σB 重组蛋白按合理免疫程序免疫家兔,获得多抗隆抗体经 Western blotting 分析显示出特异性的反应。本试验结果为 NDRV σB 蛋白功能的深入研究及基因工程疫苗的研发奠定了基础。
摘要： 为制备新型鸭呼肠孤病毒(new-type duck reovirus,NDRV)XX 株σB 蛋白的多克隆抗体,试验经 RT-PCR扩增 NDRV XX 株σB 基因编码序列,构建原核表达质粒 pET-32a(+)-σB,将其转化至大肠杆菌 BL21(DE3)感受态细胞后,经 IPTG 诱导获得 His-σB 重组蛋白。SDS-PAGE 显示成功表达出约55 ku 的融合蛋白,主要以包涵体形式存在,其表达时的最佳诱导时间、IPTG 诱导浓度分别为3 h 和0.25 mmol/L。经 Ni2+柱亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,将蛋白经 Western blotting 和蛋白质谱鉴定为高纯度的σB 重组蛋白,将纯化后σB 重组蛋白按合理免疫程序免疫家兔,获得多抗隆抗体经 Western blotting 分析显示出特异性的反应。本试验结果为 NDRV σB 蛋白功能的深入研究及基因工程疫苗的研发奠定了基础。
说明：如本页面涉及到版权问题或作者不愿意公开，请联系本站管理员删除！
| [1] | 吕恒勇 李真 李迎新 吴金鹏 . 新型藏医药浴设备研究与实现 [J]. 中医外治杂志 ,2016,1 |
| [2] | 唐英 . 新型敷料用于外伤患者伤口护理的效果观察 [J]. 航空军医 ,2018,3 |
| [3] | 郑美澜 . 新型医用护理床的设计与应用 [J]. 航空军医 ,2018,3 |
| [4] | 常皓 . 一种新型医疗垃圾处理垃圾桶的研究 [J]. 航空军医 ,2018,3 |
| [5] | 王湛 . 可保温及自动测量心率的新型听诊器 [J]. 航空军医 ,2018,3 |
| [6] | 修文茜 . 一种新型骑手健康数据监测和管理的自行车辅助装置 [J]. 航空军医 ,2018,3 |
| [7] | 周勇军 . 一种新型修复胸腰椎骨折体外撑开复位器的设计研究 [J]. 维吾尔医药 ,2018,1 |
| [8] | 刘文 . 强化心理护理对新型毒品所致精神障碍患者负性情绪的疏导作用 [J]. 航空军医 ,2018,6 |
