犬瘟热病毒V蛋白的表达、鉴定及亚细胞定位

       摘要: 为研究犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)V蛋白的功能,将 CDV V基因片段与 pGEX-6P-1载体连接,构建 pGEX-6P-1-CDV-V重组表达质粒,通过原核表达系统表达了 V蛋白,并将纯化的 V蛋白免疫 BALB/c小鼠,制备阳性血清。同时,将CDV V基因片段与 pcDNA3.1载体连接,构建 pcDNA3.1-CDV-V 重组表达质粒,经转染 Vero细胞后,用激光共聚焦技术确定 V蛋白在真核细胞中的分布及亚细胞定位。结果显示,成功表达了 V蛋白,并制备了阳性血清。重组质粒 pcDNA3.1-CDV-V在外源真核细胞 Vero 中获得了表达,表达蛋白主要聚集于细胞质。本试验结果为进行CDV V蛋白的功能研究奠定了基础。

作者:
刘莉 郝福星 袁维峰 封家旺
单位:
江苏农牧科技职业学院,泰州,225300 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193 西藏职业技术学院,拉萨,850030
出处:
《中国畜牧兽医》
刊期:
2016年第43卷第7期
基金:
公益性行业(农业)科研专项(201303042)

犬瘟热病毒V蛋白的表达、鉴定及亚细胞定位

摘要:为研究犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)V蛋白的功能,将 CDV V基因片段与 pGEX-6P-1载体连接,构建 pGEX-6P-1-CDV-V重组表达质粒,通过原核表达系统表达了 V蛋白,并将纯化的 V蛋白免疫 BALB/c小鼠,制备阳性血清。同时,将CDV V基因片段与 pcDNA3.1载体连接,构建 pcDNA3.1-CDV-V 重组表达质粒,经转染 Vero细胞后,用激光共聚焦技术确定 V蛋白在真核细胞中的分布及亚细胞定位。结果显示,成功表达了 V蛋白,并制备了阳性血清。重组质粒 pcDNA3.1-CDV-V在外源真核细胞 Vero 中获得了表达,表达蛋白主要聚集于细胞质。本试验结果为进行CDV V蛋白的功能研究奠定了基础。

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