木薯块根有色体分离及其蛋白质组学的研究

       摘要: 木薯(Manihot esculenta Crantz)块根有色体是类胡萝卜素贮藏和调控多种生理生化过程的场所.本研究发现Percoll密度梯度离心法最适合于木薯块根有色体的提取,利用光学显微镜观察发现40%~50%Percoll梯度层富含完整有色体,Western blot分析显示该层的线粒体标志酶Vdac1杂交信号较低,而质体标志酶RbcL杂交信号最高,并以此确定木薯块根有色体的分离方法.利用蛋白质组学方法显示SC9块根有色体存在34个差异蛋白质,其中上调表达17个,下调表达17个;涉及碳代谢及能量代谢相关蛋白所占比例最高.STRING蛋白质互作网络显示,Enolase 2与Elongation Factor互作关系最多,是整个互作网络的核心蛋白质.qRT-PCR定量分析显示Enolase 2在高类胡萝卜素的蛋黄木薯SC9的表达水平显著高于低类胡萝卜素品种SC6068.推测其可能是影响SC9与SC6068类胡萝卜素差异的主要蛋白质之一.

作者:
邓昌哲 姚慧 安飞飞 李开绵 陈松笔
单位:
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 /农业部木薯种质资源保护与利用重点实验室,海南儋州 571737;海南大学热带农林学院,海南海口 5702281 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 /农业部木薯种质资源保护与利用重点实验室,海南儋州,571737
出处:
《作物学报》
刊期:
2017年第43卷第9期
基金:
国家自然科学基金项目(31271776) 海南省高层次创新创业人才基金项目(2012-2016)资助.

木薯块根有色体分离及其蛋白质组学的研究

摘要:木薯(Manihot esculenta Crantz)块根有色体是类胡萝卜素贮藏和调控多种生理生化过程的场所.本研究发现Percoll密度梯度离心法最适合于木薯块根有色体的提取,利用光学显微镜观察发现40%~50%Percoll梯度层富含完整有色体,Western blot分析显示该层的线粒体标志酶Vdac1杂交信号较低,而质体标志酶RbcL杂交信号最高,并以此确定木薯块根有色体的分离方法.利用蛋白质组学方法显示SC9块根有色体存在34个差异蛋白质,其中上调表达17个,下调表达17个;涉及碳代谢及能量代谢相关蛋白所占比例最高.STRING蛋白质互作网络显示,Enolase 2与Elongation Factor互作关系最多,是整个互作网络的核心蛋白质.qRT-PCR定量分析显示Enolase 2在高类胡萝卜素的蛋黄木薯SC9的表达水平显著高于低类胡萝卜素品种SC6068.推测其可能是影响SC9与SC6068类胡萝卜素差异的主要蛋白质之一.

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