摘要: 通过定性 PCR扩增了转基因水稻 M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段, 将 PCR产物酶切连接后构建到T载体, 得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子pM12, 建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法.定性PCR结果表明, 本方法可特异性检测出M12, 检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组; 定量PCR结果表明, M12和sps定量PCR标准曲线R 2为0.998和0.997, 扩增效率为95.3%和108.4%, 重复性分析标准偏差范围为0.043～0.276, 定量极限和检测极限可达100和10拷贝.对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内.本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测.
摘要：通过定性 PCR扩增了转基因水稻 M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段, 将 PCR产物酶切连接后构建到T载体, 得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子pM12, 建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法.定性PCR结果表明, 本方法可特异性检测出M12, 检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组; 定量PCR结果表明, M12和sps定量PCR标准曲线R 2为0.998和0.997, 扩增效率为95.3%和108.4%, 重复性分析标准偏差范围为0.043～0.276, 定量极限和检测极限可达100和10拷贝.对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内.本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测.
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