龙胆泻肝汤对葡萄膜炎大鼠Notch信号通路的干预作用

       摘要: 目的 探讨龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis.EAU)大鼠Notch信号通路相关基因表达的影响.方法 Lewis大鼠用随机数字表法分为正常对照组、EAU模型组和龙胆泻肝汤干预组,后两组诱导EAU模型,龙胆泻肝汤干预组造模后用龙胆泻肝汤灌胃.免疫后12 d分别分离三组大鼠的脾脏和淋巴结收集CD4+T细胞,流式细胞仪检测Th17、Treg细胞的表达水平;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测Notch1、Notch2、Notch3、Notch4基因的表达情况;ELISA检测Notch信号通路相关蛋白的表达水平.结果 流式细胞仪检测发现,与正常对照组相比,EAU模型组大鼠脾脏和淋巴结中Th17细胞水平明显升高,Treg细胞水平降低;与EAU模型组相比,龙胆泻肝汤干预组大鼠的Th17细胞水平明显下降,Treg细胞水平升高,两者比例逐渐恢复均衡;qRT-PCR检测发现龙胆泻肝汤干预组大鼠脾脏和淋巴结中Notch1、Notch2和Notch4基因的表达在免疫后12 d高于正常对照组(均为P<0.01),但显著低于EAU模型组(均为P<0.01),Notch3基因在大鼠脾脏和淋巴结未检测到表达;ELISA检测结果发现,龙胆泻肝汤干预组大鼠脾脏和淋巴结中Notch1、Notch2和Notch4蛋白表达水平在免疫后12 d虽然高于正常对照组(均为P<0.01),但显著低于EAU模型组大鼠(均为P<0.01).结论 龙胆泻肝汤可有效缓解EAU大鼠中Th17/Treg比例失衡状态,其作用机制可能涉及到Notch信号通路调节的na(i)ve CD4+T细胞向Th17和Treg细胞的分化.

作者:
刘滨 荣立洋 孙园园 殷学伟 唐凯 毕宏生 郭大东
单位:
山东中医药大学,山东省济南市,250014 250002 山东省济南市,山东省中西医结合眼病防治重点实验室,山东中医药大学眼科研究所
出处:
《眼科新进展》
刊期:
2018年第38卷第2期
基金:
国家自然科学基金资助 山东省自然科学基金资助 山东中医药科技发展计划项目

龙胆泻肝汤对葡萄膜炎大鼠Notch信号通路的干预作用

摘要:目的 探讨龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis.EAU)大鼠Notch信号通路相关基因表达的影响.方法 Lewis大鼠用随机数字表法分为正常对照组、EAU模型组和龙胆泻肝汤干预组,后两组诱导EAU模型,龙胆泻肝汤干预组造模后用龙胆泻肝汤灌胃.免疫后12 d分别分离三组大鼠的脾脏和淋巴结收集CD4+T细胞,流式细胞仪检测Th17、Treg细胞的表达水平;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测Notch1、Notch2、Notch3、Notch4基因的表达情况;ELISA检测Notch信号通路相关蛋白的表达水平.结果 流式细胞仪检测发现,与正常对照组相比,EAU模型组大鼠脾脏和淋巴结中Th17细胞水平明显升高,Treg细胞水平降低;与EAU模型组相比,龙胆泻肝汤干预组大鼠的Th17细胞水平明显下降,Treg细胞水平升高,两者比例逐渐恢复均衡;qRT-PCR检测发现龙胆泻肝汤干预组大鼠脾脏和淋巴结中Notch1、Notch2和Notch4基因的表达在免疫后12 d高于正常对照组(均为P<0.01),但显著低于EAU模型组(均为P<0.01),Notch3基因在大鼠脾脏和淋巴结未检测到表达;ELISA检测结果发现,龙胆泻肝汤干预组大鼠脾脏和淋巴结中Notch1、Notch2和Notch4蛋白表达水平在免疫后12 d虽然高于正常对照组(均为P<0.01),但显著低于EAU模型组大鼠(均为P<0.01).结论 龙胆泻肝汤可有效缓解EAU大鼠中Th17/Treg比例失衡状态,其作用机制可能涉及到Notch信号通路调节的na(i)ve CD4+T细胞向Th17和Treg细胞的分化.

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