摘要: 目的 本研究旨在建立和使用沙门氏菌多重荧光定量 PCR 方法。方法 采用多重荧光定量 PCR 技术,针对沙门 氏菌的 invA 基因、spvC 基因、fimY 基因和 rfb 基因设计了四对特异性引物和探针。通过对不同引物和探针组合的灵敏度和特 异性进行比较,选择最佳组合。使用标准品进行线性范围和检测限的测定,并对实际样品进行检测和定量。结果 实验结果表明, 最佳引物和探针组合对于四种沙门氏菌血清型的检测具有高度的特异性和灵敏度。该方法在 10^1 ~ 10^6 拷贝 /μl 范围内具有 较好的线性关系,检测限为 10^1 ~ 10^2 拷贝 /μl。对实际样品的检测结果表明,该方法与常规培养方法高度一致,且可同时检 测和定量四种沙门氏菌血清型。结论 本研究建立的多重荧光定量 PCR 方法具有高度的特异性和灵敏度,线性范围广,检测限 低,可同时检测和定量四种沙门氏菌血清型,并且在实际应用中表现出良好的应用前景。因此,该方法具有重要的实用价值和 应用价值,对于沙门氏菌的检测和控制具有重要的意义。
摘要:目的 本研究旨在建立和使用沙门氏菌多重荧光定量 PCR 方法。方法 采用多重荧光定量 PCR 技术,针对沙门 氏菌的 invA 基因、spvC 基因、fimY 基因和 rfb 基因设计了四对特异性引物和探针。通过对不同引物和探针组合的灵敏度和特 异性进行比较,选择最佳组合。使用标准品进行线性范围和检测限的测定,并对实际样品进行检测和定量。结果 实验结果表明, 最佳引物和探针组合对于四种沙门氏菌血清型的检测具有高度的特异性和灵敏度。该方法在 10^1 ~ 10^6 拷贝 /μl 范围内具有 较好的线性关系,检测限为 10^1 ~ 10^2 拷贝 /μl。对实际样品的检测结果表明,该方法与常规培养方法高度一致,且可同时检 测和定量四种沙门氏菌血清型。结论 本研究建立的多重荧光定量 PCR 方法具有高度的特异性和灵敏度,线性范围广,检测限 低,可同时检测和定量四种沙门氏菌血清型,并且在实际应用中表现出良好的应用前景。因此,该方法具有重要的实用价值和 应用价值,对于沙门氏菌的检测和控制具有重要的意义。
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