凡纳滨对虾鳃细胞膜IHHNV衣壳蛋白受体的筛选

       摘要: 对虾传染性皮下及造血组织坏死病(IHHN)为对虾主要病毒病之一,近些年,在全球范围内广泛流行并造成严重的经济损失.目前,在流行病学和诊断方面受到重视,但其致病机理鲜有报道.本研究首先构建了IHHNV CP原核表达载体,纯化CP蛋白并制备多抗,抗体效价达到1:51200;利用匀浆、超速离心方法分离未感染IHHNV的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)鳃细胞膜蛋白;用VOPBA和HIS PULL-DOWN方法筛选凡纳滨对虾鳃细胞膜IHHNV CP受体,分别将疑似的蛋白条带进行LC-MS/MS分析.结果表明,信号转导与转录激活因子(STAT)、热休克蛋白90 (HSP 90)、酚氧化酶原2型、Na+/K+-ATP酶α亚基4种蛋白能与IHHNV衣壳蛋白产生相互作用,并具有多种生物学活性,可能参与病毒的入侵及细胞病变的产生.其具体作用有待深入研究.

作者:
尹晓彤 费荣梅
单位:
南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095
出处:
《中国水产科学》
刊期:
2015年第22卷第6期
基金:
公益性行业(农业)科研专项(201103034)

凡纳滨对虾鳃细胞膜IHHNV衣壳蛋白受体的筛选

摘要:对虾传染性皮下及造血组织坏死病(IHHN)为对虾主要病毒病之一,近些年,在全球范围内广泛流行并造成严重的经济损失.目前,在流行病学和诊断方面受到重视,但其致病机理鲜有报道.本研究首先构建了IHHNV CP原核表达载体,纯化CP蛋白并制备多抗,抗体效价达到1:51200;利用匀浆、超速离心方法分离未感染IHHNV的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)鳃细胞膜蛋白;用VOPBA和HIS PULL-DOWN方法筛选凡纳滨对虾鳃细胞膜IHHNV CP受体,分别将疑似的蛋白条带进行LC-MS/MS分析.结果表明,信号转导与转录激活因子(STAT)、热休克蛋白90 (HSP 90)、酚氧化酶原2型、Na+/K+-ATP酶α亚基4种蛋白能与IHHNV衣壳蛋白产生相互作用,并具有多种生物学活性,可能参与病毒的入侵及细胞病变的产生.其具体作用有待深入研究.

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