摘要: 为揭示牛核移植胚胎(SCNT)异常甲基化模式,选择配子期、S期、2-cell、8-cell和桑葚胚5个发育阶段的早期牛核移植胚胎作为试验组,以相应阶段的体外受精胚胎(IVF)作为对照,对核移植胚胎中呈母源印记的PWS/AS基因簇ICR区进行BSP测序,分析了SCNT和IVF胚胎不同发育时期SNRPN启动子区域甲基化水平的总体变化模式,并对该区域内的5个甲基化位点分别进行比较,筛选敏感位点.结果表明:SCNT胚胎PWS-IC甲基化水平,各期均无显著性差异(P>0.05),一直维持在较高水平;SCNT胚胎二细胞期PWS-IC甲基化水平极显著低于同期的IVF胚胎(P<0.01);该区域第1个和第5个甲基化位点是去甲基化抑制机制的易感位点.因此,PWS-IC区域甲基化模式改变,导致了SCNT胚胎母源DNA的高甲基化,推测与SCNT胚胎发生过早甲基化重建相关.研究结果可为提高SCNT胚胎克隆成功效率提供理论借鉴.
摘要: 为揭示牛核移植胚胎(SCNT)异常甲基化模式,选择配子期、S期、2-cell、8-cell和桑葚胚5个发育阶段的早期牛核移植胚胎作为试验组,以相应阶段的体外受精胚胎(IVF)作为对照,对核移植胚胎中呈母源印记的PWS/AS基因簇ICR区进行BSP测序,分析了SCNT和IVF胚胎不同发育时期SNRPN启动子区域甲基化水平的总体变化模式,并对该区域内的5个甲基化位点分别进行比较,筛选敏感位点.结果表明:SCNT胚胎PWS-IC甲基化水平,各期均无显著性差异(P>0.05),一直维持在较高水平;SCNT胚胎二细胞期PWS-IC甲基化水平极显著低于同期的IVF胚胎(P<0.01);该区域第1个和第5个甲基化位点是去甲基化抑制机制的易感位点.因此,PWS-IC区域甲基化模式改变,导致了SCNT胚胎母源DNA的高甲基化,推测与SCNT胚胎发生过早甲基化重建相关.研究结果可为提高SCNT胚胎克隆成功效率提供理论借鉴.
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